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安捷倫氣相色譜儀測定魚油中DHA和EPA的含量
更新時候:2018-04-21   點擊次數:2983次
 

淺(qian)(qian)(qian)(qian)海(hai)魚(yu)(yu)油指(zhi)(zhi)從淺(qian)(qian)(qian)(qian)海(hai)中魚(yu)(yu)兒蕨(jue)類藤(teng)(teng)本植(zhi)物體中收集出來的(de)(de)不趨于穩定脂肪的(de)(de)有(you)效(xiao)成(cheng)分,分離為(wei)EPA和DHA。魚(yu)(yu)油指(zhi)(zhi)包含(han)(han)EPA(二(er)是(shi)碳五烯酸(suan))、DHA(二(er)是(shi)二(er)碳六烯酸(suan))的(de)(de)魚(yu)(yu)休(xiu)內(nei)(nei)的(de)(de)油垢污漬。實質魚(yu)(yu)休(xiu)內(nei)(nei)含(han)(han)EPA、DHA生長率(lv)極(ji)微,主要(yao)嚴冬(dong)地區淺(qian)(qian)(qian)(qian)海(hai)里的(de)(de)魚(yu)(yu),如三文魚(yu)(yu)、沙丁魚(yu)(yu)等休(xiu)內(nei)(nei)EPA、DHA濃度*,與此同時(shi)浮(fu)游(you)生物任何蕨(jue)類藤(teng)(teng)本植(zhi)物休(xiu)內(nei)(nei)幾乎不標EPA、DHA。是(shi)以使用的(de)(de)淺(qian)(qian)(qian)(qian)海(hai)魚(yu)(yu)來提(ti)練EPA及DHA。

度(du)化功能模(mo)塊(kuai)

1、廚衛降低血脂,清理血栓(shuan),避免出現血初凝,顧慮腦血栓(shuan)、腦溢血及腦出血。

2、顧慮核(he)心區炎、延(yan)緩痛風(feng)發作、心臟病,異(yi)地延(yan)緩由(you)核(he)心區炎吸(xi)引的腫痛。

3、戒心中老(lao)年階段足智多謀癥、營養前腦(nao)、改進處理影象。

4、改善目力、預防老(lao)花眼。

5、保(bao)護措施眼(yan)底黃斑。

 

拉著開支者(zhe)需(xu)量(liang)的有(you)(you)時帶來(lai),專業市場上魚油(you)原料(liao)層見(jian)疊出,但其(qi)可行有(you)(you)效成分EPA、DHA分子量(liang)產生大不同之處,是以,創辦魚油(you)原料(liao)中EPA與(yu)DHA的飛速測試體例,識(shi)別冒(mao)牌貨(huo)物,有(you)(you)自然的是啥意思。

 

一(yi)、試試看不規則 

1.1  

儀器設備及資科

安捷倫(lun)液相色譜儀7820a(附氫火花正離(li)子化(hua)檢查器) 

1.2  色譜基本前提

 

色譜柱:Alltech EC-1000,30m×0.25mm×0.25μm;液相色譜(pu)柱攝(she)氏度:198 ℃恒濕3 min,以10 ℃/min變熱至248 ℃,保持良(liang)好12 min;進(jin)(jin)樣(yang)口(kou)攝(she)氏度:280 ℃;FID判斷器攝(she)氏度:280 ℃;進(jin)(jin)樣(yang)體(ti)例:分(fen)配(pei),分(fen)配(pei)比30:1;進(jin)(jin)樣(yang)量:1μL;載氣:氫氣。 

1.3  化(hua)學藥品

 

EPA/DHA甲(jia)酯標準(zhun)標準(zhun)化品(溶解度(du)≥99%),內(nei)標物——二13碳(tan)酸(suan)甲(jia)酯標準(zhun)標準(zhun)化品(溶解度(du)≥99%),均購于國外SIGMA廠家。2 mol/L氫陽極脫色鉀(jia)(jia)-甲醇(chun)稀硫酸。正(zheng)庚烷(wan)、甲醇(chun)均為色譜(pu)純、氫陽極脫色鉀(jia)(jia)為闡發純。 

1.4  操控(kong)操作步驟

1.4.1  標準(zhun)規范(fan)硫(liu)酸銅(tong)溶液分離純(chun)化

  DHA甲酯(zhi)、EPA甲酯(zhi)、二十(shi)四碳酸甲酯(zhi)規(gui)范(fan)起來樣(yang) 品:均配比成液(ye)(ye)體(ti)(ti)濃度為1.0 mg/mL的正(zheng)庚(geng)(geng)烷液(ye)(ye)體(ti)(ti)。 1.4.2  圖紙制作[4] 稱取鋼(gang)材拉伸(shen)試驗500 mg至具塞(sai)(sai)試管(guan)內,用移(yi)(yi)(yi)液(ye)(ye)管(guan)移(yi)(yi)(yi)取5 mL正(zheng)庚(geng)(geng)烷消融鋼(gang)材拉伸(shen)試驗,用移(yi)(yi)(yi)液(ye)(ye)管(guan)移(yi)(yi)(yi)取2 mL氫被氧化鉀(jia)—甲(jia)醇液(ye)(ye)體(ti)(ti),蓋(gai)緊(jin)玻璃(li)紙蓋(gai)狠惡振搖(yao)1 min后,加蒸溜(liu)水至試管(guan)頭頸部,移(yi)(yi)(yi)至離心式法計心情好以3000 r/min離心式法5 min,移(yi)(yi)(yi)取2 mL上(shang)清液(ye)(ye)至具塞(sai)(sai)試管(guan),插(cha)足2 mL內標液(ye)(ye),定容置10 mL,供上(shang)機檢測。以正(zheng)規品保(bao)存之時定性處理,由完全品行校訂要素來定量分析在乎魚油圖紙中的EPA和(he)DHA含量。

1.4.2  樣品管理提純

稱取(qu)坯料500 mg至具(ju)塞試分液(ye)(ye)漏(lou)斗,用移(yi)液(ye)(ye)管(guan)移(yi)取(qu)5 mL正庚烷(wan)消融坯料,用移(yi)液(ye)(ye)管(guan)移(yi)取(qu)2 mL氫硫化鉀—甲(jia)醇懸(xuan)濁液(ye)(ye),蓋住安全玻璃蓋狠惡振搖1 min后,加萃取(qu)水至試管(guan)下顎(e),放置于抽(chou)濾(lv)分離計(ji)情緒(xu)以3000 r/min抽(chou)濾(lv)分離5 min,移(yi)取(qu)2 mL上清液(ye)(ye)至具(ju)塞試管(guan),干預2 mL內標(biao)液(ye)(ye),定容(rong)置10 mL,供(gong)上機測得。以規則品保(bao)持當時定義,由絕對化品質保(bao)證校訂系數來化學發光(guang)法斤斤計(ji)較(jiao)魚油(you)仿(fang)品中的EPA和DHA的含量。

1.4.3  科研成果較真 

對所(suo)獲資金的色譜圖,以(yi)上標法(fa)停(ting)止工作作品(pin)比(bi)較(jiao): 

  

式中(zhong):AX—EPA、DHA的(de)峰戶(hu)型(xing)建(jian)筑面積;AIS—內(nei)標峰的(de)峰戶(hu)型(xing)建(jian)筑面積;

FX—EPA或DHA的(de)(de)校訂細(xi)胞;WIS—產(chan)品(pin)(pin)(pin)的(de)(de)產(chan)品(pin)(pin)(pin)的(de)(de)樣品(pin)(pin)(pin)英(ying)文中內標物的(de)(de)插足量(liang)(mg);WS—產(chan)品(pin)(pin)(pin)的(de)(de)產(chan)品(pin)(pin)(pin)的(de)(de)樣品(pin)(pin)(pin)英(ying)文量(liang)(mg);FW—EPA、DHA甲(jia)酯(zhi)換算(suan)成EPA、DHA的(de)(de)換算(suan)細(xi)胞,EPA=1.105,DHA=1.096;25—產(chan)品(pin)(pin)(pin)的(de)(de)產(chan)品(pin)(pin)(pin)的(de)(de)樣品(pin)(pin)(pin)英(ying)文前處里階段中精濃(nong)公倍數(shu)。

二(er)、成績會商

 

2.1  樣品英文(wen)前預防體(ti)(ti)例的隨意挑選 

油(you)脂代謝物中(zhong)脂肪堆積酸的測(ce)量所有目(mu)前甲(jia)酯(zhi)化(hua)應急(ji)處置,總是采用的甲(jia)酯(zhi)化(hua)體例(li)有三氟化(hua)PENG法(fa)、*基(ji)氫硫化(hua)硫(TMSH)法(fa)、甲(jia)醇鉀(jia)法(fa)、重(zhong)氮甲(jia)wan、稀鹽酸/甲(jia)醇、氫被氧化(hua)的鉀(jia)/甲(jia)醇和氫硫化(hua)四(si)甲(jia)胺/甲(jia)醇等[5]。本文(wen)作(zuo)者首要(yao)裝氫硫化(hua)鉀(jia)/甲(jia)醇法(fa),應男人性(xing)驗測(ce)魚油(you)機器設備中(zhong)的EPA與(yu)DHA,該法(fa)應具支配簡短、便捷(jie)的杭(hang)州特色。 2.2  EPA甲(jia)酯(zhi)和DHA甲(jia)酯(zhi)的色譜不愛了 

海底魚油備樣參與(yu)內(nei)標C23:0甲酯的(de)氣相(xiang)色(se)譜分析儀色(se)譜圖(tu)見圖(tu)1

  

由圖1探及,EPA甲(jia)酯、DHA甲(jia)酯和(he)C23:0甲(jia)酯 的恢復階段離別為(wei)12.898 min、18.052 min、14.785 min,分為(wei)三類(lei)脂(zhi)肪多酸甲酯前女(nv)友(you)楷模,還有別的類(lei)物質不攪擾測得(de)。 

2.3  校訂指數公(gong)式的校正 

使用內標(biao)法得出(chu)EPA甲(jia)酯和DHA甲(jia)酯對里(li)標(biao)C23:0甲(jia)酯的(de)決對的(de)品質校(xiao)訂(ding)細胞因子,結果見表1。

  

2.4  體例緊硬度

 

取規范海(hai)洋魚油供試品(pin)5份,按(an)1.4.2上述步分析,1.4.3降(jiang)鈣素(su)原檢測闡發,得EPA和DHA的緊孔隙率(lv),收獲見表(biao)2。

  

2.5  EPA和(he)DHA的(de)收受接手率(lv)

 

于(yu)100 mg的(de)海洋魚油合(he)格(ge)品中分離插(cha)足(zu)斷(duan)然量的(de)EPA和DHA,按1.4.2提出的(de)環節校正(zheng)方法,1.4.3按量闡發,進樣機(ji)會為(wei)5次,校正(zheng)方法成績見表3。

  

2.6  樣(yang)板測(ce)定方法

 

對3種賣(mai)(mai)場上發賣(mai)(mai)的淺海魚油印(yin)刷品(pin)管理(li)止住校正,校正科研(yan)成果見(jian)表4。由表4能知,印(yin)刷品(pin)管理(li)1中(zhong)(zhong)EPA、DHA純(chun)度(du)比標(biao)(biao)稱(cheng)統(tong)計(ji)數據(ju)庫較著偏高(gao),印(yin)刷品(pin)管理(li)2、3中(zhong)(zhong)EPA、DHA純(chun)度(du)與標(biao)(biao)稱(cheng)統(tong)計(ji)數據(ju)庫之基(ji)適(shi)用。 

 

三、論述

 

內(nei)(nei)標(biao)(biao)法(fa)是色(se)譜色(se)譜邊(bian)上是一種移就報負的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)參(can)考值(zhi)(zhi)體例(li),它(ta)重(zhong)定向(xiang)內(nei)(nei)標(biao)(biao)物(wu)(wu)與(yu)被闡發運輸(shu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)化學物(wu)(wu)質脾氣(qi)要類試(shi),而對(dui)操控基本(ben)前提重(zhong)定向(xiang)不(bu)太高,內(nei)(nei)標(biao)(biao)法(fa)是測(ce)試(shi)肌肉(rou)酸(suan)(suan)(suan)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)堆(dui)(dui)積(ji)酸(suan)(suan)(suan)含(han)鋅量的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)便利性準確(que)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)參(can)考值(zhi)(zhi)體例(li)。常規所(suo)有(you)利于C17:0等單飽(bao)和狀態(tai)點肌肉(rou)酸(suan)(suan)(suan)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)堆(dui)(dui)積(ji)酸(suan)(suan)(suan)甲(jia)酯(zhi)是測(ce)試(shi)肌肉(rou)酸(suan)(suan)(suan)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)堆(dui)(dui)積(ji)酸(suan)(suan)(suan)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)內(nei)(nei)標(biao)(biao)物(wu)(wu),其(qi)補(bu)齊之后(hou)(hou)與(yu)EPA和DHA的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)補(bu)齊之后(hou)(hou)差值(zhi)(zhi)大。利于二13碳飽(bao)和狀態(tai)點肌肉(rou)酸(suan)(suan)(suan)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)堆(dui)(dui)積(ji)酸(suan)(suan)(suan)甲(jia)酯(zhi)是測(ce)試(shi)EPA、DHA的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)內(nei)(nei)標(biao)(biao)物(wu)(wu),其(qi)脾氣(qi)和EPA、DHA旁邊(bian),補(bu)齊之后(hou)(hou)在其(qi)實兩者中(zhong)間,或者所(suo)經方式的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)差別魚油印(yin)刷品的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)闡發,鋼材拉(la)伸試(shi)驗(yan)中(zhong)*不(bu)包含(han)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)C23:0,不(bu)受到鋼材拉(la)伸試(shi)驗(yan)中(zhong)別人(ren)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)混(hun)合(he)物(wu)(wu)峰的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)影響力,能知足準確(que) 檢驗EPA和DHA的提起(qi)。

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