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安捷倫氣相色譜儀測定魚油中DHA、EPA的含量
更新時候:2018-12-25   點擊次數:3255次

安捷倫氣相色譜儀測定魚油中DHA和EPA的含量-淺(qian)海魚(yu)油各(ge)指從淺(qian)海中魚(yu)種(zhong)觀(guan)賞(shang)動植物體(ti)中收集出來的(de)(de)(de)不飽和點(dian)皮下脂肪氣體(ti),離別為(wei)EPA和DHA。魚(yu)油各(ge)指所含(han)(han)(han)EPA(四(si)十碳五烯酸)、DHA(四(si)十三碳六(liu)烯酸)的(de)(de)(de)魚(yu)胃中的(de)(de)(de)揮發性的(de)(de)(de)油脂。通俗易懂魚(yu)胃中含(han)(han)(han)EPA、DHA總數極微,只有(you)極寒(han)天氣自然環境淺(qian)海里(li)的(de)(de)(de)魚(yu),如三文魚(yu)、沙丁魚(yu)等胃中EPA、DHA含(han)(han)(han)磷量*,因此(ci)海域其他的(de)(de)(de)觀(guan)賞(shang)動植物胃中終必沒含(han)(han)(han)EPA、DHA。是以(yi)選(xuan)擇淺(qian)海魚(yu)來提練EPA及DHA。

度化功能表

1、慢慢調理高(gao)血脂,企業清算(suan)血栓(shuan),以免 血漿沉淀,顧(gu)慮腦(nao)血栓(shuan)、腦(nao)溢(yi)血及腦(nao)中風。

2、顧慮核心(xin)(xin)區(qu)(qu)炎、降底(di)尿酸高、哮喘病,被臨時(shi)降底(di)由核心(xin)(xin)區(qu)(qu)炎導致(zhi)的腫痛(tong)。

3、顧慮老(lao)齡(ling)穎(ying)悟(wu)癥、養份腦部、處理影(ying)象。

4、換代目力(li)、防冶老花眼。

5、養(yang)護視膜。

 

隨著(zhu)費(fei)用者需(xu)用量的(de)不由(you)自主(zhu)增加,領域(yu)上(shang)魚油產品層見疊出(chu),但其有用的(de)成分EPA、DHA占比發(fa)生較(jiao)少的(de)差別,是以(yi),開設魚油產品中EPA與(yu)DHA的(de)快速(su)驗(yan)測體(ti)例,辨明(ming)冒充(chong)警察(cha)物質,配備(bei)必要的(de)的(de)意思。

 

一、試(shi)試(shi)看整(zheng)體 

1.1  

實驗(yan)儀器及資源

安捷倫氣質聯用色譜儀(yi)7820A(附氫火柱(zhu)亞鐵離子化加測器) 

1.2  色譜基礎

 

色譜:Alltech EC-1000,30m×0.25mm×0.25μm;色譜柱溫度:198 ℃恒溫3 min,以10 ℃/min升溫至248 ℃,保持12 min;進樣口溫度:280 ℃;FID檢測器溫度:280 ℃;進樣體例:分流,分流比30:1;進樣量:1μL;載氣:氮氣。 

1.3  免疫(yi)試劑

 

EPA/DHA甲酯(zhi)標(biao)準(zhun)品(溶解(jie)度≥99%),內標(biao)物——二十四(si)碳酸甲酯(zhi)標(biao)準(zhun)品(溶解(jie)度≥99%),均購于(yu)芬蘭SIGMA品牌。2 mol/L氫(qing)空氣被氧(yang)化(hua)鉀-甲(jia)(jia)醇氫(qing)被氧(yang)化(hua)鈉(na)溶液。正庚烷、甲(jia)(jia)醇均(jun)為(wei)色譜純、氫(qing)空氣被氧(yang)化(hua)鉀為(wei)闡發(fa)純。 

1.4  使用步

1.4.1  原則液體(ti)制作

  DHA甲酯、EPA甲酯、二13碳酸甲酯實(shi)驗室管(guan)理標(biao)準(zhun)樣 品:均配成成氨水濃(nong)度為1.0 mg/mL的(de)(de)正庚烷(wan)氫(qing)硫(liu)化鈉懸濁液。 1.4.2  仿品管(guan)理提純[4] 稱取試(shi)(shi)件500 mg至具(ju)塞試(shi)(shi)分液漏斗(dou),用(yong)移液管(guan)移取5 mL正庚烷(wan)消融試(shi)(shi)件,用(yong)移液管(guan)移取2 mL氫(qing)硫(liu)化鉀(jia)—甲醇氫(qing)硫(liu)化鈉懸濁液,蓋(gai)住有(you)機玻(bo)璃蓋(gai)狠惡振搖1 min后,加減壓純凈(jing)水至試(shi)(shi)管(guan)脖子,放至離心式力(li)計愉悅以3000 r/min離心式力(li)5 min,移取2 mL上清(qing)液至具(ju)塞試(shi)(shi)管(guan),參與(yu)2 mL內標(biao)液,定(ding)(ding)容(rong)置10 mL,供(gong)上機旋光(guang)度的(de)(de)測定(ding)(ding)。以實(shi)驗室管(guan)理標(biao)準(zhun)品保(bao)存期間確(que)定(ding)(ding),由肯定(ding)(ding)品控校訂系數(shu)來(lai)按量比較魚油(you)仿品管(guan)理中(zhong)的(de)(de)EPA和DHA的(de)(de)含量。

1.4.2  供試品(pin)制(zhi)作

稱取巖(yan)樣(yang)500 mg至(zhi)具(ju)塞試(shi)管(guan)內,用(yong)(yong)移液(ye)管(guan)移取5 mL正庚烷消(xiao)融巖(yan)樣(yang),用(yong)(yong)移液(ye)管(guan)移取2 mL氫(qing)氧化的(de)鉀—甲醇(chun)氫(qing)氧化鈉溶液(ye),蓋起來玻(bo)璃紙蓋狠惡振搖1 min后,加(jia)分(fen)餾水至(zhi)試(shi)管(guan)脖(bo)子,放置(zhi)到抽濾力計身心以(yi)3000 r/min抽濾力5 min,移取2 mL上清液(ye)至(zhi)具(ju)塞試(shi)管(guan),插足2 mL內標(biao)液(ye),定(ding)容置(zhi)10 mL,供上機旋(xuan)光(guang)度的(de)測定(ding)。以(yi)標(biao)準(zhun)品補(bu)齊階段判定(ding),由決(jue)對的(de)質量(liang)校訂要(yao)素來酶聯免疫法較真魚油樣(yang)件中的(de)EPA和DHA含水量(liang)。

1.4.3  工作成果在乎 

對得出的(de)色譜圖(tu),之(zhi)外標法消停技術成果比(bi)較(jiao): 

 

式中:AX—EPA、DHA的峰(feng)大小;AIS—內標峰(feng)的峰(feng)大小;

FX—EPA或DHA的校(xiao)訂成分;WIS—樣(yang)機中(zhong)內標物的干預量(liang)(liang)(mg);WS—樣(yang)機量(liang)(liang)(mg);FW—EPA、DHA甲酯換(huan)算成EPA、DHA的換(huan)算成分,EPA=1.105,DHA=1.096;25—樣(yang)機前加(jia)工應(ying)用程(cheng)序(xu)中(zhong)原諒(liang)我(wo)真的喝醉(zui)了 因(yin)為我(wo)真的想你的 一不小心 我(wo)知(zhi)道這(zhe)樣(yang)不應(ying)該(gai) 對你泰國依賴 陪數。

二、安捷倫氣相色譜儀測定魚油中DHA和EPA的含量科技成果(guo)會(hui)商(shang)

 

2.1  圖紙前加工體例(li)的選定 

揮發性(xing)的(de)(de)油(you)脂中脂肪含量酸的(de)(de)測定方法(fa)(fa)一切需要甲(jia)(jia)酯(zhi)化(hua)正確處理(li),不時合理(li)利用的(de)(de)甲(jia)(jia)酯(zhi)化(hua)體例有(you)三(san)氟(fu)化(hua)朋法(fa)(fa)、*基氫空(kong)氣(qi)硫化(hua)的(de)(de)硫(TMSH)法(fa)(fa)、甲(jia)(jia)醇鉀法(fa)(fa)、重氮(dan)甲(jia)(jia)完、硝酸/甲(jia)(jia)醇、氫硫化(hua)的(de)(de)鈉/甲(jia)(jia)醇和(he)氫空(kong)氣(qi)硫化(hua)的(de)(de)四甲(jia)(jia)胺/甲(jia)(jia)醇等[5]。中心句首需用氫空(kong)氣(qi)硫化(hua)的(de)(de)鉀/甲(jia)(jia)醇法(fa)(fa),共性(xing)性(xing)探測魚油(you)生產(chan)設備中的(de)(de)EPA與DHA,該法(fa)(fa)滿足調(diao)控(kong)概括、短(duan)時間(jian)的(de)(de)一大(da)特色。 2.2  EPA甲(jia)(jia)酯(zhi)和(he)DHA甲(jia)(jia)酯(zhi)的(de)(de)色譜分手之后(hou) 

深海魚油樣品插手內標C23:0甲酯的氣相色譜圖見圖1

 

由(you)圖(tu)1常見,EPA甲(jia)酯(zhi)、DHA甲(jia)酯(zhi)和(he)C23:0甲(jia)酯(zhi) 的恢復時間(jian)分別為12.898 min、18.052 min、14.785 min,3種脂肪酸(suan)酸(suan)甲(jia)酯(zhi)男(nan)朋友出(chu)軌杰出(chu)青(qing)年,與此同時任何類物質不(bu)攪擾(rao)法測定。 

2.3  校訂分子的測定方(fang)法 

尊重(zhong)內標法測出EPA甲(jia)酯(zhi)(zhi)(zhi)和(he)DHA甲(jia)酯(zhi)(zhi)(zhi)對里標C23:0甲(jia)酯(zhi)(zhi)(zhi)的決對品性(xing)校訂成(cheng)分,成(cheng)果展見表(biao)1。

 

2.4  體例緊強(qiang)度

 

取一致(zhi)的海(hai)底魚(yu)油印(yin)刷(shua)品5份,按1.4.2表(biao)明工作步驟(zou)測得(de),1.4.3按量闡發(fa),得(de)EPA和DHA的緊黏度,重大成就見(jian)表(biao)2。

 

2.5  EPA和DHA的收(shou)受交接(jie)率

 

于(yu)100 mg的海洋(yang)魚油印(yin)刷品中分別(bie)參與(yu)必化(hua)學發(fa)光法(fa)的EPA和DHA,按1.4.2提出(chu)的步聚判(pan)斷方法(fa),1.4.3化(hua)學發(fa)光法(fa)闡(chan)發(fa),進樣每(mei)一次為5次,判(pan)斷方法(fa)研究成(cheng)果見表(biao)3。

 

2.6  樣品管(guan)理旋(xuan)光度的測定

 

對3種茶葉(xie)市場(chang)上發賣(mai)的大海魚油樣(yang)件(jian)終(zhong)止法(fa)測,法(fa)測工作成效見表4。由表4推測,樣(yang)件(jian)1中EPA、DHA含鋅(xin)(xin)量比(bi)標稱(cheng)數據(ju)源(yuan)信息較著偏少,樣(yang)件(jian)2、3中EPA、DHA含鋅(xin)(xin)量與(yu)標稱(cheng)數據(ju)源(yuan)信息之基符合國家。 

三、安捷倫氣相色譜儀測定魚油中DHA和EPA的含量論調

 

內標法是氣相色譜傍邊一種比擬抱負的定量體例,它請求內標物與被闡發物資的化學性子要類似,而對操縱前提請求不高,內標法是測定脂肪酸含量的便利精確的定量體例。普通凡是利用C17:0等單飽和脂肪酸甲酯作為測定脂肪酸的內標物,其保留時候與EPA和DHA的保留時候相差較大。利用二十三碳飽和脂肪酸甲酯作為測定EPA、DHA的內標物,其性子和EPA、DHA附近,保留時候位于二者之間,并且經由進程差別魚油樣品的闡發,試樣中*不含有C23:0,不受試樣中別的組分峰的影響,能知足精確 測定EPA和DHA的請求。

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